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高中生物選修3的知識(shí)點(diǎn)
高考高中生物選修知識(shí)點(diǎn)
專題一基因工程
基因工程的概念
基因工程是指按照人們的愿望,進(jìn)行嚴(yán)格的設(shè)計(jì),通過體外DNA重組和轉(zhuǎn)基因技術(shù),賦予生物以新的遺傳特性,創(chuàng)造出更符合人們需要的新的生物類型和生物產(chǎn)品。基因工程是在D
。ㄒ唬┗蚬こ痰幕竟ぞ
1.“分子手術(shù)刀”——限制性核酸內(nèi)切酶(限制酶)
(1)來源:
主要是從原核生物中分離純化出來的。(2)功能:
能夠識(shí)別雙鏈DNA分子的某種特定的核苷酸序列,并且使每一條鏈中特定部位的兩個(gè)核苷酸之間的磷酸二酯鍵斷開,因此具有專一性。(3)結(jié)果:
經(jīng)限制酶切割產(chǎn)生的DNA 片段末端通常有兩種形式:黏性末端和平末端。
2.“分子縫合針”——(1)兩種DNA連接酶(E·coliDNA連接酶和T4-DNA連接酶)的比較:
、傧嗤c(diǎn):都縫合磷酸二酯鍵。②區(qū)別:
E·coliDNA將雙鏈DNA酯鍵連接起來;而T4DNA端,但連接平末端的之間的效率較低。(2)與DNA聚合酶作用的異同:
DNA聚合酶只能將單個(gè)核苷酸加到已有的核苷酸片段的末端,形成磷酸二酯鍵。DNA連接酶是連接兩個(gè)DNA 片段的末端,形成磷酸二酯鍵。
3.“分子運(yùn)輸車”——載體(1)載體具備的'條件:
、倌茉谑荏w細(xì)胞中復(fù)制并穩(wěn)定保存。
、诰哂幸恢炼鄠(gè)限制酶切點(diǎn),供外源DNA 片段插入。
、劬哂袠(biāo)記基因,供重組DNA的鑒定和選擇。(2)最常用的載體是質(zhì)粒,它是一種裸露的、結(jié)構(gòu)簡(jiǎn)單的、獨(dú)立于細(xì)菌染色體之外,并具有自我復(fù)制能力的雙鏈環(huán)狀DNA分子。(3)其它載體:噬菌體的衍生物、動(dòng)植物病毒。
(二)基因工程的基本操作程序
第一步:目的基因的獲取
1.目的基因是指:編碼蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)基因。2.合成。人工合成目的基因的常用方法有反轉(zhuǎn)錄法_和化學(xué)合成法_。3.PCR技術(shù)擴(kuò)增目的基因(1)原理:DNA雙鏈復(fù)制(2)過程:
第一步:加熱至90~95℃DNA解鏈;
第二步:冷卻到55~60℃,引物結(jié)合到互補(bǔ)D第三步:加熱至70~75℃,熱穩(wěn)定DNA聚合酶從引物起始互補(bǔ)鏈的合成。
第二步:基因表達(dá)載體的構(gòu)建1.目的:并且可以遺傳至下一代,使目的基因能夠表達(dá)和發(fā)揮作用。2.組成:目的基因+啟動(dòng)子+終止子+標(biāo)記基因(1)啟動(dòng)子:是一段有特殊結(jié)構(gòu)的DNA 片段,位于基因的首端,是RNA聚合酶識(shí)別和結(jié)合的部位,能驅(qū)動(dòng)基因轉(zhuǎn)錄出mRNA,最終獲得所需的蛋白質(zhì)。
。2)終止子:也是一段有特殊結(jié)構(gòu)的DNA 片段,位于基因的尾端。
。3)標(biāo)記基因的作用:是為了鑒定受體細(xì)胞中是否含有目的基因,從而將含有目的基因的細(xì)胞篩選出來。常用的標(biāo)記基因是抗生素基因。
第三步:將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞_1.轉(zhuǎn)化的概念:
是目的基因進(jìn)入受體細(xì)胞內(nèi),并且在受體細(xì)胞內(nèi)維持穩(wěn)定和表達(dá)的過程。2.常用的轉(zhuǎn)化方法:
將目的基因?qū)胫参锛?xì)胞:采用最多的方法是農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法,其次還有基因槍法和花粉管通道法等。
將目的基因?qū)雱?dòng)物細(xì)胞:最常用的方法是顯微注射技術(shù)。此方法的受體細(xì)胞多是受精卵。
將目的基因?qū)胛⑸锛?xì)胞:原核生物作為受體細(xì)胞的原因是繁殖快、多為單細(xì)胞、遺傳物質(zhì)相對(duì)較少,最常用的原核細(xì)胞是大腸桿
4.因抗蟲植物是否出現(xiàn)抗蟲性狀。
。ㄈ┗蚬こ痰膽(yīng)用1.植物基因工程:
抗蟲、抗病、抗逆轉(zhuǎn)基因植物,利用轉(zhuǎn)基因改良植物的品質(zhì)。2.動(dòng)物基因工程:
提高動(dòng)物生長(zhǎng)速度、改善畜產(chǎn)品品質(zhì)、用轉(zhuǎn)基因動(dòng)物生產(chǎn)藥物。3.基因治療:
把正常的外源基因?qū)氩∪梭w內(nèi),使該基因表達(dá)產(chǎn)物發(fā)揮作用。
菌,其轉(zhuǎn)化方法是:先用Ca2+處理細(xì)胞,使其成為感受態(tài)細(xì)胞,再將重組表達(dá)載體DNA分子溶于緩沖液中與感受態(tài)細(xì)胞混合,在一定的溫度下促進(jìn)感受態(tài)細(xì)胞吸收DNA分子,完成轉(zhuǎn)化過程。
3.重組細(xì)胞導(dǎo)入受體細(xì)胞后,篩選含有基因表達(dá)載體受體細(xì)胞的依據(jù)是標(biāo)記基因是否表達(dá)。
第四步:目的基因的檢測(cè)和表達(dá)
1.插入了目的基因,方法是采用DNA分子雜交技術(shù)。
2.,方法是采用用標(biāo)記的目的基因作探針與
3.最后檢測(cè)目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì),方法是從轉(zhuǎn)基因生物中提取蛋白質(zhì),用相應(yīng)的抗體進(jìn)行抗原-抗體雜交。
。ㄋ模┑鞍踪|(zhì)工程的概念
蛋白質(zhì)工程是指以蛋白質(zhì)分子的結(jié)構(gòu)規(guī)律及其生物功能的關(guān)系作為基礎(chǔ),通過基因修飾或基因合成,對(duì)現(xiàn)有蛋白質(zhì)進(jìn)行改造,或制造一種新的蛋白質(zhì),以滿足人類的生產(chǎn)和生活的需求。(基因工程在原則上只能生產(chǎn)自然界已存在的蛋白質(zhì))
專題2細(xì)胞工程
。ㄒ唬┲参锛(xì)胞工程
1.理論基礎(chǔ)(原理):細(xì)胞全能性
2全能性表達(dá)的難易程度:受精卵>生殖細(xì)胞>干細(xì)胞>體細(xì)胞;植物細(xì)胞>動(dòng)物細(xì)胞
植物組織培養(yǎng)技術(shù)(1)過程:
離體的植物器官、組織或細(xì)胞―→愈傷組織―→試管苗―→植物體(2)用途:
微型繁殖、作物脫毒、制造人工種子、單倍體育種、細(xì)胞產(chǎn)物的工廠化生產(chǎn)。(3)地位:
是培育轉(zhuǎn)基因植物、植物體細(xì)胞雜交培育植物新品種的最后一道工序。
3.植物體細(xì)胞雜交技術(shù)(1)過程:
胞分裂生長(zhǎng)到表面相互抑制時(shí),細(xì)胞就會(huì)停止分裂增殖,這種現(xiàn)象稱為細(xì)胞的接觸抑制。(4)動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)需要滿足以下條件:①無菌、無毒的環(huán)境:
培養(yǎng)液應(yīng)進(jìn)行無菌處理。通常還要在培養(yǎng)液中添加一定量的抗生素,以防培養(yǎng)過程中的污染。此外,應(yīng)定期更換培養(yǎng)液,防止代謝產(chǎn)物積累對(duì)細(xì)胞自身造成危害。②營(yíng)養(yǎng):
合成培養(yǎng)基成分:糖、氨基酸、促生長(zhǎng)因子、無機(jī)鹽、微量元素等。通常需加入血清、血漿等天然成分。
、蹨囟龋哼m宜溫度:哺乳動(dòng)物多是36.5℃+0.pH:④氣體環(huán)境:
95%空氣+O2是細(xì)胞代謝所必需的,CO2pH。(5)動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)的應(yīng)用:
制備病毒疫苗、制備單克隆抗體、檢測(cè)有毒物質(zhì)、培養(yǎng)醫(yī)學(xué)研究的各種細(xì)胞。
。2)誘導(dǎo)融合的方法:物理法包括離心、振動(dòng)、電刺激等;瘜W(xué)法一般是用聚乙二醇(PEG)作為誘導(dǎo)劑。
。3)意義:克服了遠(yuǎn)緣雜交不親和的障礙。
(二)動(dòng)物細(xì)胞工程
1.動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)(1)概念:
動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)就是從動(dòng)物機(jī)體中取出相關(guān)的組織,將它分散成單個(gè)細(xì)胞,然后放在適宜的培養(yǎng)基中,讓這些細(xì)胞生長(zhǎng)和繁殖。(2)動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的流程:
取動(dòng)物組織塊(動(dòng)物胚胎或幼齡動(dòng)物的器官或組織)→剪碎→用胰蛋白酶或膠原蛋白酶處理分散成單個(gè)細(xì)胞→制成細(xì)胞懸液→轉(zhuǎn)入培養(yǎng)瓶中進(jìn)行原代培養(yǎng)→貼滿瓶壁的細(xì)胞重新用胰蛋白酶或膠原蛋白酶處理分散成單個(gè)細(xì)胞繼續(xù)傳代培養(yǎng)。
。3)細(xì)胞貼壁和接觸抑制:
懸液中分散的細(xì)胞很快就貼附在瓶壁上,稱為細(xì)胞貼壁。細(xì)胞數(shù)目不斷增多,當(dāng)貼壁細(xì)
3
2.動(dòng)物體細(xì)胞核移植技術(shù)和克隆動(dòng)物
。1)哺乳動(dòng)物核移植可以分為胚胎細(xì)胞核移植(比較容易)和體細(xì)胞核移植(比較難)。(2)選用去核卵(母)細(xì)胞的原因:卵(母)細(xì)胞比較大,容易操作;卵(母)細(xì)胞細(xì)胞質(zhì)多,營(yíng)養(yǎng)豐富。
。3)體細(xì)胞核移植技術(shù)的應(yīng)用:
、偌铀偌倚筮z傳改良進(jìn)程,促進(jìn)良畜群繁育;②保護(hù)瀕危物種,增大存活數(shù)量;
③生產(chǎn)珍貴的醫(yī)用蛋白;④作為異種移植的供體;⑤用于組織器官的移植等。
。4)體細(xì)胞核移植技術(shù)存在的問題:
4克隆動(dòng)物存在著健康問題、表現(xiàn)出遺傳和生理缺陷等。
動(dòng)物細(xì)胞融合
動(dòng)物細(xì)胞融合也稱細(xì)胞雜交,是指兩個(gè)或多個(gè)動(dòng)物細(xì)胞結(jié)合形成一個(gè)細(xì)胞的過程。融合后形成的具有原來兩個(gè)或多個(gè)細(xì)胞遺傳信息的單核細(xì)胞,稱為雜交細(xì)胞。
動(dòng)物細(xì)胞融合與植物原生質(zhì)體融合的'原理基本相同,誘導(dǎo)動(dòng)物細(xì)胞融合的方法與植物原生質(zhì)體融合的方法類似,常用的誘導(dǎo)因素有聚乙二醇、滅活的病毒、電刺激等。
動(dòng)物細(xì)胞融合的意義:克服了遠(yuǎn)緣雜交的不親和性,成為研究細(xì)胞遺傳、細(xì)胞免疫、腫瘤和生物新品種培育的重要手段。
4.單克隆抗體
抗體:一個(gè)B淋巴細(xì)胞只分泌一種特異性抗體。從血清中分離出的抗體產(chǎn)量低、純度低、特異性差。
雜交瘤細(xì)胞的特點(diǎn):既能大量繁殖,又能產(chǎn)生專一的抗體。
單克隆抗體的優(yōu)點(diǎn):特異性強(qiáng),靈敏度高,并能大量制備。
單克隆抗體的作用:
、僮鳛樵\斷試劑:準(zhǔn)確識(shí)別各種抗原物質(zhì)的細(xì)微差異,并跟一定抗原發(fā)生特異性結(jié)合,具有準(zhǔn)確、高效、簡(jiǎn)易、快速的優(yōu)點(diǎn)。
、谟糜谥委熂膊『瓦\(yùn)載藥物:主要用于治療癌癥治療,可制成“生物導(dǎo)彈”,也有少量用于治療其它疾病。
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